Celični motilec je pogosto uporabljen eksperimentalni instrument, ki se uporablja za razbijanje bioloških celic in sproščanje znotrajceličnih snovi.Princip delovanja razbijalca celic temelji na principu fizičnega razbijanja in mehanskega nihanja, namen razbijanja celic pa se doseže z zagotavljanjem dovolj energije za uničenje strukture celic.
Načelo delovanja celičnega motilca bo podrobno predstavljeno spodaj.Glavne komponente motilnika celic vključujejo regulator hitrosti, komoro za drobljenje, kroglo za drobljenje in cevovod za vzorce itd. Med njimi se regulator hitrosti uporablja za nadzor hitrosti vrtenja komore za drobljenje, ki je posoda za shranjevanje vzorcev in drobilnih kroglic, drobilne krogle pa razbijejo celice s trkom ob vzorce.Pred uporabo celičnega motilca je treba najprej izbrati ustrezen motilec.Običajno uporabljeni mediji za drobljenje so steklene kroglice, kovinske kroglice in kremenčeve kroglice.
Glavna dejavnika pri izbiri medija za drobljenje sta narava vzorca in namen drobljenja.Na primer, za krhke celice se lahko za motnje uporabijo manjše steklene kroglice;za težje celice lahko izberemo kroglice iz trše kovine.Med postopkom drobljenja dajte vzorec, ki ga želite zdrobiti, v posodo za drobljenje in dodajte ustrezno količino medija za drobljenje.Nato hitrost vrtenja drobilne komore nadzira krmilnik hitrosti, tako da imata drobilni medij in vzorec stalen mehanski trk.Ti trki lahko porušijo strukturo celice s prenosom energije, razpadom celičnih membran in organelov ter sproščanjem znotrajceličnih materialov.
Delovni proces celičnega disruptorja vključuje predvsem naslednje ključne dejavnike: hitrost vrtenja, velikost in gostoto drobilnega medija, čas drobljenja in temperaturo.Prva je hitrost vrtenja.Izbiro hitrosti vrtenja je treba prilagoditi glede na različne vrste celic in lastnosti vzorca.
Na splošno je za mehke celice mogoče izbrati višjo hitrost vrtenja, da se poveča pogostost trkov in tako učinkoviteje motijo celice.Pri trših celicah, ker so bolj vzdržljive, je mogoče zmanjšati hitrost vrtenja, da zmanjšate motnje vzorca.
Drugi je velikost in gostota drobilnega medija.Velikost in gostota drobilnega medija neposredno vplivata na učinek drobljenja.Manjši moteči mediji lahko zagotovijo več točk trka, zaradi česar je lažje motiti celične strukture.Večji drobilni mediji zahtevajo daljši čas drobljenja.
Poleg tega bo gostota drobilnega medija vplivala tudi na silo trka, previsoka gostota lahko povzroči čezmerno drobljenje vzorca.Čas motenj je pomemben parameter za motnje celic.Izbira časa drobljenja je treba določiti glede na vrsto vzorca in učinek drobljenja.Običajno daljši kot je čas motenj, bolj temeljito so celice motene, vendar lahko povzroči tudi poškodbe drugih delov vzorca.Zadnji je nadzor temperature.Vpliva temperature na celično fragmentacijo ni mogoče prezreti.Previsoka temperatura lahko povzroči denaturacijo beljakovin in nukleinskih kislin v celicah, kar vpliva na učinek fragmentacije.Zato je priporočljivo izvajati razgradnjo celic v kriogenih pogojih, kar je mogoče zmanjšati z uporabo hladilne naprave ali delovanjem na ledu.
Motilci celic igrajo pomembno vlogo v bioloških raziskavah.Z razumnim nadzorom parametrov, kot so vrtilna hitrost, velikost in gostota drobilnega medija, čas drobljenja in temperatura, je mogoče doseči učinkovito drobljenje celic.Po razbitju celic lahko pridobimo različne vrste snovi v celicah, kot so proteini, nukleinske kisline, encimi itd., ki predstavljajo pomembno podlago za nadaljnje analize in raziskave.Skratka, celični motilec je pomemben eksperimentalni instrument, njegov princip delovanja pa temelji na principu fizičnega lomljenja in mehanskih vibracij.Učinkovito razbijanje celic je mogoče doseči z nadzorovanjem različnih parametrov, kot so hitrost vrtenja, velikost in gostota razdiralne snovi, čas prekinitve in temperatura.Motilec celic se pogosto uporablja in zagotavlja udobje in podporo raziskovalcem pri sorodnih raziskavah na področju biologije.
Čas objave: 6. september 2023